家养牛肝菌内生真菌分说判断及其生物学特色（三）

2.4 家养牛肝菌内生真菌的家养菌内菌分生物学特色

2.4.1 3种哺育基对于内生真菌妨碍速率的影响

为把握4株内生真菌的生物学特色，抉择CPDA、牛肝Pachlewski、生真说判MMN为供试哺育基，断及钻研3种哺育基对于菌丝妨碍速率的其生影响，25℃哺育，物学在9cm的特色平板上接管十字交织法丈量菌落直径，服从如图4所示。家养菌内菌分由图4可知，牛肝在哺育第4d时妨碍菌落直径丈量，生真说判CPDA上的断及妨碍速率清晰优于其余2种哺育基，内生真菌LCTG12哺育5d，其生LCCK-6哺育6d，物学BSHC-18哺育7d，特色BBFO-10哺育8d可长满平板，家养菌内菌分故抉择CPDA哺育基为4种内生真菌的最适哺育基。

2.4.2 液态发酵对于内生真菌生物量的影响

在上述试验的根基上，抉择CPDA哺育基妨碍4种内生真菌的液态摇瓶试验，在25℃，160r/min条件下哺育0～10d，群集0、二、四、六、八、10d的菌丝，3次平行试验统计服从如图5所示。由图5可知，0～8dLCTG十二、LCCK-六、BBFO-10生物量均呈削减趋向，第8d时LCTG-12的生物量为4.13g/L，LCCK-6为1.65g/L，BBFO-10为3.44g/L，此时生物量最大，之后再也不削减，这可能与哺育基中营养物资破费殆尽无关。可是BSHC-18的液态发酵菌丝量削减飞快，最高为1.14g/L，这与黄瘤孢菌（BSHC-18）的胞子孳生的生物学特色无关，可见它不适于液态发酵妨碍菌丝。

2.4.3 家养牛肝菌内生真菌的拮抗性

为探究牛肝菌内生真菌之间是否存在拮抗关连，本试验妄想从牛肝菌中分出的3株内生真菌，妨碍坚持试验，在25℃条件下哺育5d，盖姆斯木霉LCTG-十二、黄瘤孢菌BSHC-18以及尖孢镰刀菌BBFO-10的比力组菌落形态如图1-a-一、1-c-1以及1-d-1所示，拮抗坚持图如图6所示。

由图6a可知，盖姆斯木霉对于尖孢镰刀菌的妨碍具备拮抗熏染，其菌落与镰刀菌打仗的领土处，镰刀菌有清晰向外退缩妨碍，由于每一组坚持配置3组一再，故其对于尖孢镰刀菌的平均抑制率为53.7%；由图6b可知，黄瘤孢菌与尖孢镰刀菌之间可相互抑制妨碍，且黄瘤孢菌产黄色胞子的光阴清晰延后，相互的平均抑制率分说为：41.8%、33.6%；由图6c可知，盖姆斯木霉对于黄瘤孢菌的妨碍有清晰的抑制作用，黄瘤孢菌未有产孢天气，其对于黄瘤孢菌的平均抑制率为74.7%。

3 论断

食药用菌内生真菌是一类尚未短缺开拓与运用，而且运用远景普遍的微生物，为探究家养牛肝菌中内生真菌资源，及合成其内生真菌间是否存在拮抗关连，本文从3种别致家养牛肝菌籽实体中分说纯化共患上到23株纯菌，筛选出4株具备典型特色的纯菌妨碍形态审核以及ITSrDNA今世份子生物学判断，判断出4株内生真菌分说为盖姆斯木霉、克鲁伊假丝酵母、黄瘤孢菌及尖孢镰刀菌，并对于多少株内生真菌生物学特色妨碍钻研，患上出论断：CPDA哺育基较适宜这4株菌的妨碍，其中盖姆斯木霉的妨碍速率较快，5d即可长满9cm的平板，其余3种菌株长满板的光阴分说为六、七、8d，而且盖姆斯木霉对于黄瘤孢菌以及尖孢镰刀菌菌丝妨碍均有拮抗熏染，黄瘤孢菌以及尖孢镰刀菌两者之间也具备拮抗熏染。由于试验接管家养分解哺育基的规模性，故本钻研所辨此外菌株不能残缺诠释家养牛肝菌内生真菌的群系，其中盖姆斯木霉菌株展现出的拮抗熏染，表明其具备确定的生防运用后劲，可为牛肝菌等大型真菌生前途程中会泛起的菇体侵蚀以及根腐病，提供确定的生防运用价钱。内生真菌的次级代谢产物丰硕，进一步钻研其内生真菌可能发生妄想别致、活性普遍的次级代谢产物，对于新型药用资源开拓具备紧张的意思，而牛肝菌内生真菌代谢产物与其是否相同或者临近尚有待钻研。本文也为之后家养牛肝菌家养驯化历程中，钻研其外部情景与内生真菌的关连提供参考。

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